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生物相容性高分子多孔体的制造方法、生物相容性高分子多孔体、生物相容性高分子块体及细胞构建体

来源:恒峰娱乐ag厅下载登录   发布时间:2019-11-26   点击量:128

生物相容性高分子多孔体的制造方法、生物相容性高分子多孔体、生物相容性高分子块体及细胞构建体

本发明的课题在于提供一种可以提供显示较高的细胞数量及较高的血管数量的细胞构建体的生物相容性高分子多孔体及其制造方法、以及生物相容性高分子块体及细胞构建体。根据本发明,可以提供生物相容性高分子多孔体的制造方法、以及生物相容性高分子多孔体、生物相容性高分子块体及细胞构建体,该制造方法包含:(a)将生物相容性高分子的溶液冷却成未冷冻状态的工序,其中,溶液中液温最高的部分的温度与溶液中液温最低的部分的温度之差为2.5℃以下,且溶液中液温最高的部分的温度为溶剂的熔点以下;(b)对工序(a)中所得到的生物相容性高分子的溶液进行冷冻的工序;及(c)对工序(b)中所得到的冷冻的生物相容性高分子进行冷冻干燥的工序。

(C)具有与序列号1所记载的氨基酸序列具有80%W上的同源性的氨基酸序列且具有生物相容性的蛋白质。

在此,中屯、部的血管系细胞密度能够通过数实际的薄切标本的细胞数量并将细胞数量除W体积来求出。此处的中屯、部如下规定。设为在前述中屯、部沿垂直方向切取薄切标本的厚度量而得到的部分。细胞密度的求法例如如下:将上述测定对象的血管系细胞染色的薄切标本和细胞核染色的薄切标本重叠并将重叠的细胞核的数量进行计数,由此能够计算出中屯、部的血管系细胞数量,体积可通过使用ImageJ求出中屯、部的面积并乘W该薄切标本的厚度来求出。

优选在工序(a)中,即将产生凝固热之前的溶液中液溫最高的部分的溫度与溶液中液溫最低的部分的溫度之差为2.5°CW下。

[00間图12表示"AA"及"BB"中所得到的CBE3多孔体的均匀性评价(二维傅立叶变换与轴向功率谱)。

(a)使个别调整的镶嵌状细胞块彼此融合、或

由差溫较小的冷冻工序•多孔体制作差溫小块体(多孔体的粉碎和交联)

另外,本发明的细胞构建体也包含使用细胞为两种W上且含有非血管系细胞及血管系细胞运两者的本发明的细胞构建体来形成有血管的细胞构建体。并且,在此,"细胞为两种W上且含有非血管系细胞及血管系细胞运两者的本发明的细胞构建体"的优选范围与上述相同。构建血管的方法例如可W举出对将血管部分挖空成隧道状的凝胶材料贴附混合有血管系细胞的细胞片,一边使培养液在隧道中流动一边进行培养的方法。并且,通过在细胞片之间W=明治状夹入血管系细胞,也能够构建血管。

其结果,各自的溫度与其差溫的轮廓如图7、图8所示。

hMSC+hECFC镶嵌细胞块

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